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          革蘭染色液

          簡要描述:

          革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師Gram創立。未經染色之細菌,由于其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征,而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復染法。

          更新時間:2019-03-30

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          [產品介紹:原理]

          革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,肽聚糖網層次較多且交聯致密,乙醇脫色時,肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結晶紫與碘復合物溶出,因此乙醇脫色后再經番紅復染,呈紅色。

           

          革蘭染色液使用說明書

          【產品名稱】通用名稱:革蘭染色液

                      產品型號:JRBGL4S

          【包裝規格】每種染色液的包裝規格為每瓶50 ml、100ml、250ml500ml,整組染色液的包裝規格為:4×50ml、4×100ml、4×250ml4×500ml。

          【預期用途】用于細菌或真菌的涂片染色。

          【檢測原理】革蘭陽性菌的細胞壁有一層比革蘭陰性菌厚的肽聚糖,能與結晶紫緊密結合,不容易被脫色液洗掉,在此基礎上形成了革蘭染色液試劑。

          【主要成成

          主要

          主要成分

          規格

          數量

          50ml

          4×100ml

          4×250ml

          500ml

          結晶紫染色液(A液)

          結晶紫

          50ml/瓶

          100ml/瓶

          250ml/瓶

          500ml/瓶

          1瓶

          碘液(B液)

          碘、碘化鉀

          50ml/瓶

          100ml/瓶

          250ml/瓶

          500ml/瓶

          1瓶

          95%乙醇溶液(C液)

          乙醇

          50ml/瓶

          100ml/瓶

          250ml/瓶

          500ml/瓶

          1瓶

          番紅染色液(D液)

          番紅

          50ml/瓶

          100ml/瓶

          250ml/瓶

          500ml/瓶

          1瓶

           

          【儲存條件及有效期】

          1、原包裝未開封染色液的有效期為12個月,在有效期內的已開封染色液應在開封后6個月內使用完,每次用后應及時擰緊瓶蓋,以免揮發或變質。

          2、儲存條件:本試劑應貯存在相對濕度不大于80%,無腐蝕性氣體和通風良好的10℃~30℃常溫環境。

          3、生產日期和失效日期:詳見外包裝標簽。

          【樣本要求】待檢標本應為菌株或有菌株的標本。

          【檢驗方法】

          1.涂片

          取一潔凈載玻片,滴一小滴生理鹽水于玻片中央,按無菌操作要求,先用接種環,挑取少量某菌培養物于玻片中央水滴中,涂布均勻。要求涂片薄且均勻,使其自然干燥。

          2.固定

          菌液涂片干燥后通過火焰 1-2 次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。

          3.染色

          一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:

          1初染:滴加結晶紫染色液(A液)覆蓋玻片涂布區,染色1分鐘,水洗。

          2媒染:滴加(B液)碘液后染色1分鐘,水洗。

          3脫色:甩凈載玻片上水分,傾斜玻片,并襯以白紙,用95%乙醇溶液(C液)滴洗至無紫色褪下時為宜,時間20-60s。

          (4)復染:滴加蕃紅染色液(D液后,染色1-2分鐘,水洗。

          (5)吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。

          【檢驗結果的解釋】在顯微鏡下觀察染色結果:

          1、在顯微鏡下觀察到紫色或深紫藍色菌落為革蘭染色陽性菌。  

          2、在顯微鏡下觀察到紅色或粉紅色菌落為革蘭染色陰性菌。 

          【檢驗方法的局限性】有些細菌有染色嗜變性,不一定完全是染色原因,應根據菌體形態加以確定。

          【注意事項】

          1、該染色液僅用于體外診斷。      

          2、涂片厚薄要均勻,自然干燥后再加熱固定。

          3、酒精脫色過度或復染的時間不能太長,陽性菌可被誤染為陰性菌;酒精脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽性菌。

          4、所用標本應視為具有傳染性物質。

           

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